讓你從零開(kāi)始搞懂PCR實(shí)驗室規劃設計

之前有小伙伴問(wèn)小編如何建一個(gè)標準的PCR實(shí)驗室?PCR實(shí)驗室如何設計規劃才堪稱(chēng)專(zhuān)業(yè)?PCR實(shí)驗室管理又有哪些注意要點(diǎn)?今天小編就幫你剖析PCR實(shí)驗室規劃設計標準，讓你從0開(kāi)始搞懂PCR實(shí)驗室規劃設計。

PCR實(shí)驗室又叫基因擴增實(shí)驗室。PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻譯為聚合酶鏈式反應，取名效法“原子核裂變鏈式反應” 。其反應效果也是名符其實(shí)，通過(guò)一對預先設計的引物、耐熱的DNA聚合酶以及反應原料，即可在體外模擬DNA復制的過(guò)程：

→首先將待擴增DNA模板加熱變性解鏈;

→隨之冷卻至某一溫度時(shí)，引物與待擴增模板序列發(fā)生退火結合;

→再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。

接下來(lái)介紹一下標準的PCR 實(shí)驗室分為四個(gè)區域，分別為：

1.試劑配制區;

2.樣品處理區;

3.核酸擴增區;

4.產(chǎn)物分析區;

設計要點(diǎn)

PCR實(shí)驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗，通常應經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗過(guò)程，若實(shí)驗工藝需要，還應增加樣品粉碎過(guò)程。

一、分散形式PCR實(shí)驗室

所謂分散形式PCR實(shí)驗室，是指完成上述實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗之間不易相互干擾，因此無(wú)需特殊條件要求。

二、組合形式PCR實(shí)驗室

所謂組合形式PCR實(shí)驗室, 是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗過(guò)程的實(shí)驗用房相鄰布置，組成獨立實(shí)驗區域的形式。對于組合形式PCR實(shí)驗室，由于各個(gè)實(shí)驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間，以減少室內外空氣交換。
基因擴增實(shí)驗室又稱(chēng)PCR實(shí)驗室，其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加，廣泛應用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域。
PCR實(shí)驗室原則上分為四個(gè)單獨的工作區域：試劑準備區、標本制備區、擴增區和擴增產(chǎn)物分析區。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區域必須嚴格遵循單一方向原則，即只能從試劑準備區→標本制備區→擴增區→擴增產(chǎn)物分析區，不得逆向流動(dòng)。

基本要求：
1、各區域必須是相互獨立的；
2、各區域的儀器設備及各種物品必須是專(zhuān)用的；
3、各區完全獨立，緩沖間可有可無(wú)。如為一個(gè)區套一個(gè)區的模式，區間不能直通，必須有緩沖間，保證兩個(gè)區域間始終處于隔離狀態(tài)；
試劑準備區：擴增試劑的配制，分裝和保存，本區氣壓應保持微正壓。主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器、紫外燈。
標本制備區：實(shí)驗室樣品的混樣和測試樣品的制備。工作區域為負壓或減壓，安裝排風(fēng)系統。主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴、紫外燈。
擴增區：PCR擴增反應體系的配制和模板的加入，核酸擴增。工作區域為負壓或減壓，安裝排風(fēng)系統。主要設備有核酸擴增設備、冰箱、潔凈工作臺、離心機、加樣器、紫外燈。
擴增產(chǎn)物分析區：擴增產(chǎn)物的測定。工作區為負壓，安裝排風(fēng)系統。使用儀器有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。
PCR實(shí)驗室規劃圖